با افزایش روز افزون کاربرد فلوسایتومتری در زمینه پیگیری و مانیتورینگ درمان بیمارانی که تحت درمان بدخیمی های هماتولوژیکی هستند، اهمیت کارایی و دقت مانیتورینگ minimal residual disease(MRD) در پیش بینی و پیش آگهی درمان ثابت شده و روبه افزایش است.
از نظر بالینی سطوح تشخیصی به میزان 1 سلول در 10000 سلول (0.01%) کاهش پیدا می کند. این امر نه تنها به روش های حساس و سخت نیاز ندارد بلکه می توان تعداد زیادی از سلول ها (بیشتر از 500000 سلول) را نیز آزمایش کرد.
پروتکل Lysis Bulk اجازه می دهد تا دقت بیشتری در مطالعات فلوسایتومتری که در آن تعداد زیادی از سلول ها مورد نیاز است، به دست آید. یکی از موارد مهم و اصلی استفاده از این محلول در تست MRD(minimal residual disease) می باشد و این محلول برای افزایش دستیابی به نتایج دقیق در زمینه تشخیص این بیماری کمک بسیار زیادی می کند.
مطالعات شواهدي را نشان ميدهد که استفاده از Bulk lysing می تواند دقت آماري نمونه هايي که براي تشخيص MRD ارائه مي شوند را نسبت به نمونه هایی که توسط روش های رایج ارائه شده اند افزايش داده و زمان انجام تست را به طرز محسوسی کاهش داد.
در آزمایشی 10 مورد pre-B ALL در زمان های متفاوت ( روز 8 و روز 28) به علاوه 10 نمونه از بیماران MM که در حال درمان بودند جمع آوری شدند و این نمونه ها توسط پروتکلی استاندارد و مرسوم رنگ آمیزی و لایز شدند و با نمونه های مشابه که با Bulk Lysis لایز شده بودند مقایسه گردید.
این مقایسه نشان داد نمونه هایی که با Bulk Lysis لایز شده اند ریکاوری سلولی بیشتری دارند. بنابراین سلول های نرمال و غیرنرمال بصورت دقیق تر تعیین شدند واین امر باعث شد که وجود و عدم وجود بیماری دقیق تر تشخیص داده شود.
با استفاده از محلول Bulk Lysis فقط در یک مرحله می توان مقدار زیادی از گلبول های سفید را آماده و در پنل MRD استفاده کرد.Lysis Bulk یک محلول لایز هیپوتونیک است که گلبول های قرمز را در نمونه های خون محیطی و مغز استخوان، قبل از رنگ آمیزی ایمونوفلورسانس بصورت اسموتیک لایز می کند.
Bulk lysing با استفاده از پرلایز کردن ml1 نمونه و با آمونیوم کلراید، انکوباسیون و یکبار شستشو با PBS انجام می شود. که نمونه به هم چسبیده و در PBS و یا PRMI به صورت معلق در می آید.
در ادامه میتوانید ویدیویی مربوط به نحوه ی کار کردن با این محلول را مشاهده نمایید.
[Spider_Single_Video track=”4″ theme_id=”4″ priority=”1″]
همچنین میتوانید محلول های لایزیز شرکت سما تشخیص را در بخش محصولات و از طریق لینک زیر مشاهده نمایید.
https://samatashkhis.com/products/flowcytometry-antibodies-kits/lisis/
